Bien préparer son tri sur CyPS
Il est obligatoire que chaque utilisateur ait pris connaissance de la charte qui régie la plateforme CyPS.
Aucune manipulation n’est autorisée sur la plateforme. Vos échantillons doivent être entièrement préparés dans votre laboratoire et apportés dans des boîtes adaptées.
Pour des besoins applicatifs particuliers, contactez nous.
La préparation de vos échantillons
Vos préparations cellulaires à trier doivent être préparées et conditionnées STERILEMENT.
Toute préparation NON STERILE sera REFUSEE sur le trieur.
Vos échantillons seront (re)-filtrés juste avant le passage sur la machine.
Les échantillons sont acquis dans des tubes en polystyrène Falcon 12×75 mm.
Concentration recommandée: 2×106 à 10×106 cellules/ml en fonction du type cellulaire et de la préparation. Avant votre premier RDV contactez nous pour une recommandation adaptée à vos échantillons.
Le matériel que vous devez apporter
• Des filtres (50µm ou 40µm en général).
• Des tubes en polystyrène ou polypropylène Falcon 12×75 mm ou eppendorf 1,5ml à 2 ml contenant 500µL de SVF pour récolter les cellules trièes. Pour un meilleur rendement, nous vous recommandons de les coater préalablement avec du SVF. Pour cela: remplir le(s) tube(s) de SVF, laisser à 37°C 30min, jeter le SVF et remettre 500µL de SVF). Prévoyez plus de tubes de récolte que nécessaire.
• Des tubes en polystyrène stériles 12×75 mm pour les filtrations.
• Du milieu ou PBS 1X.
Tout ce matériel doit être STERILE.
Les échantillons nécessaires pour règler correctement votre protocole
Pour règler correctement le protocole de tri et faire la déconvolution des données, nous vous demandons:
• des cellules non marquées
• des cellules monomarquées dans chacune de vos couleurs
• des billes de compensation marquées dans chaque couleur contenant des billes positives et négatives
• pour vérifier que la déconvolution est correcte: un tube de cellules marquées avec tous les anticorps/colorants de la combinaison choisie.