Bien préparer votre rendez-vous sur le trieur FACSAriaII
La préparation de vos échantillons
Vos préparations cellulaires à trier doivent être préparées et conditionnées STERILEMENT. Toute préparation NON STERILE sera REFUSEE sur le trieur.
Vos échantillons seront (re)-filtrés juste avant le passage sur la machine.
Les échantillons sont acquis dans des tubes en polystyrène Falcon 12×75 mm.
Concentration recommandée: 5×106 cellules/ml pour un tri à vitesse “normale” et plus concentrée, 20×106 cellules/ml pour un tri à “haute vitesse”. Avant votre premier RDV contactez nous pour une recommandation adaptée à votre type cellulaire.
Le matériel que vous devez apporter
• Des filtres (50µm ou 40µm en général) (ex : Réf 340630 chez BD pour des filtres cup-type 50µm).
• Des tubes en polystyrène Falcon 12×75 mm ou eppendorf 1,5ml contenant 500µL de SVF pour récolter les cellules trièes. Pour un meilleur rendement, nous vous recommandons de les coater préalablement avec du SVF. Pour cela: remplir le(s) tube(s) de SVF, laisser à 37°C 30min, jeter le SVF et remettre 500µL de SVF). Prévoyez plus de tubes de récolte que nécessaire.
• Des tubes stériles 12×75 mm supplémentaires pour les filtrations.
• Du milieu ou PBS 1X.
Tout ce matériel doit être STERILE.
Les échantillons nécessaires pour règler correctement votre protocole
Pour règler correctement un protocole en multi-couleurs nous vous demandons:
• pour la sensibilité des détecteurs : des cellules monomarquées dans chacune de vos couleurs
• pour la matrice de compensation : un tube par billes de compensation marquées dans chaque couleur contenant des billes positives et négatives
• pour vérifier que les compensations sont correctes: un tube de cellules marquées avec tous les anticorps/colorants de la combinaison choisie.
